Evaluación de la capacidad de fijación del nitrógeno atmosférico de las bacterias asociadas con la rizosfera de plantas de Solanum tuberosum L. Var. Superchola en la provincia de Tungurahua
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Date
2023-09
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Abstract
The present study was developed with the purpose of isolating, quantifying,
characterizing, evaluating and conserving free-living bacteria associated with the
potato rhizosphere with atmospheric nitrogen fixation capacity, from soil samples
from four localities in the province of Tungurahua. First, soil samples were collected
from the potato crop and placed in plastic containers of 6 L capacity, where tubers of
the Superchola variety were planted. After 60 days, samples of rhizospheric soil (area
near the roots) were extracted. For isolation, the pour plate method was used in Jensen
culture medium free of nitrogen sources. To quantify viable bacteria per gram of soil
from each locality, serial solutions were prepared where 100 µl were deposited in solid
medium, incubated for 72 hours at 30 ºC in inverted position and the plate count was
performed. The locality of Santa Rita in the canton of Pillaro had the highest number
of CFU/g of soil. A total of 72 isolates were obtained from the potato rhizosphere, of
which only 38 isolates produced a positive reaction with the color change of the
medium modified with bromothymol blue from green to blue, these were subjected to
morphological and cultural characterization. In relation to morphology, 84% were
predominantly Gram (-) bacteria, bacilli (95%) and their grouping was mostly in the
form of diplobacilli (37%). In the cultural characterization, the following shapes
predominated: circular (42%), entire margin (84%), smooth texture (87%), flat surface
(42%), smooth consistency (82%) and 95% showed brightness. The bacterial isolate
with the greatest capacity to fix atmospheric nitrogen was (T1-FCAGP-BFN1) from
the El Placer sector of the Quero canton, which had no statistically significant
difference with respect to isolates T3-FCAGP-BFN14, T3-FCAGP-BFN16 and T4-
FCAGP-BFN24. The purified isolates were deposited in eppendorf tubes with 15%
glycerol and BHI liquid medium + 20% glycerol and stored at -20 ºC. The bacterial
isolates with the highest nitrogen-fixing capacity obtained could be used to determine
their plant growth-promoting activity in greenhouses prior to their possible use as
biofertilizers under field conditions.
Description
El presente estudio se desarrolló con la finalidad de aislar, cuantificar, caracterizar,
evaluar y conservar bacterias de vida libre asociados a la rizosfera de la papa con
capacidad de fijación nitrógeno atmosférico, a partir de muestras de suelo de cuatro
localidades de la provincia de Tungurahua. En primer lugar, se recolectaron muestras
de suelo del cultivo de papa, que se depositaron en recipientes plásticos de 6 L de
capacidad, donde se plantaron tubérculos de la variedad Superchola, tras 60 días se
extrajeron muestras de suelo rizosférico (zona cercana a las raíces). Para el aislamiento
se empleó el método de vertido en placa en medio de cultivo Jensen libre de fuentes
de nitrógeno. Para cuantificar bacterias viables por gramo de suelo de cada localidad
se prepararon disoluciones seriadas donde se depositaron 100 µl en medio sólido, se
incubaron durante 72 horas a 30 ºC en posición invertida y se realizó el recuento en
placa. La localidad de Santa Rita del cantón Pillaro tuvo mayor cantidad de UFC/g de
suelo. Un total de 72 aislados se obtuvieron de la rizosfera de papa, de los cuales solo
38 aislados produjeron una reacción positiva con el cambio de color del medio
modificado con azul de bromotimol de verde a azul, estos se sometieron a
caracterización morfológica y cultural. En relación a la morfología predominaron en
un 84% las bacterias Gram (-), bacilos (95%) y su agrupación mayormente fue en
forma de diplobacilos (37%). En la caracterización cultural predominaron las formas:
circular (42%), margen entero (84%), textura lisa (87%), superficie plana (42%),
consistencia suave (82%) y el 95% presentaron brillo. El aislado bacteriano con mayor
capacidad de fijar nitrógeno atmosférico fue el (T1-FCAGP-BFN1) de el sector El
Placer del cantón Quero que no tuvo diferencia estadísticamente significativa respecto
a los aislados T3-FCAGP-BFN14, T3-FCAGP-BFN16 y T4-FCAGP-BFN24. Los
aislados purificados se depositaron en tubos eppendorf con glicerol al 15% y medio
líquido BHI + glicerol al 20% que fueron conservados a -20 ºC. Los aislados
bacterianos con mayor capacidad de fijación de nitrógeno obtenidos se podrían utilizar
para determinar su actividad promotora del crecimiento vegetal en invernadero previo
a su posible utilización como biofertilizantes en condiciones de campo.
Keywords
AGRONOMIA, NITRÓGENO ATMOSFÉRICO, BACTERIAS ASOCIADAS, CULTIVO, BACTERIAS, RIZOSFERA, Solanum tuberosum L. Var. Superchola, PLANTAS, RIZOSFERA DE PLANTAS, AISLAMIENTO, FIJACIÓN DE NITRÓGENO, NITRÓGENO, RIZOBACTERIAS